COMMON PROBLEM
常见问题
非洲猪瘟荧光定量PCR检测出假阳性怎么办？
主要原因是：实验室被污染、样本或者气泡干扰、电压不稳导致的基线不稳定。非洲猪瘟病毒感染是血液和组织中病毒载量非常高，经常检测到CT值为15左右的样本。样本处理和提取的过程中需要进行离心操作，这样高浓度的样本离心时容易造成气溶胶污染。解决方法：加强人员培训，养成良好的实验习惯，建立有效的沟通和激励机制，荧光定量PCR实验室分试剂配制区、样本处理区、核酸扩增区、严格分区管理，不同区域的移液器用不同的标识区分，防止混用。
PCR仪运行中突然断电怎么办？
一般我们建议在实验室配置USP电源，这样能够保证PCR仪器在运行过程中能够正常的供电，从而保证程序的正常运行。PCR仪在运行中突然断电的话，如果仪器有断电保护功能，则可直接继续运行程序。如没有USP电源，突然断电而导致PCR程序不能完成，为了保证实验结果的真实性，建议只能重复实验再上机检测。
磁珠结团怎么办？
结团原因：1、由磁珠本身特性所以造成，2、由磁珠所处试剂环境所造成。3、磁珠表面吸附了大量核酸。4、杂质太多
解决方法：修改试剂配方，优化试剂配制去除杂质。
解决方法：修改试剂配方，优化试剂配制去除杂质。
核酸得率低
裂解环节出现问题（主要是结合的时候磁珠不团结）
洗脱环节出现问题（主要表现为结团的磁珠未被打散）
解决方法：1、更换洗脱液且严格按照SOP操作流程
2、加大力度震荡磁珠或用吸头吹吸、搅拌。
2、加大力度震荡磁珠或用吸头吹吸、搅拌。
核酸纯度低
A260/A280要在1.7-2.0之间，低于1.7则存在蛋白污染，高于2.0存在RNA污染这时需对裂解环节进行优化。A260/A230小于1.5，则认为存在污染考虑是盐类污染，需对洗涤环节进行优化。还有可能是醇类污染，需对晾干时间进行优化。