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TTC染色是TTC和活细胞线粒体内的琥珀酸脱氢酶反应,生成红色的甲臜,用来表示细胞的活力。它是评价脑缺血损伤常用的指标。TTC是脂溶性光敏感复合物,它是呼吸链中吡啶—核苷结构酶系统的质子受体,与正常组织中的脱氢酶反应而呈红色,而缺血组织内脱氢酶活性下降,不能反应,故不会产生变化呈苍白。故可以用来染色检测哺乳动物组织的缺血梗塞。
【实验方法】
Step1:取脑:可麻醉后直接取脑或经生理盐水灌注后取脑。因为脑组织未用多聚甲醛固定,所以较软,取脑时更应仔细,保持大脑的完整性;
Step2:-20℃冰箱中速冻20分钟左右,便于切片;
Step3:切片:一般切成5-6片,每隔2mm切一片。第一刀在脑前极与视交叉连线中点处;第二刀在视交叉部位;第三刀在漏斗柄部位;第四刀在漏斗柄与后叶尾极之间。如果需计算面积的话,应切得均匀或用专门的脑槽;
Step4:将切片置于2%TTC中;
Step5:用锡箔纸盖住后,放入37℃温箱15~30min,不时翻动脑片,使均匀接触到染色液;
Step6:取出切片后摆放整齐拍照。
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