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肝纤维化是多种慢性肝病发展至肝硬化的共同病理学基础,虽然对肝纤维化的研究已从细胞水平进入分子水平,但肝纤维化动物模型的建立,仍是临床研究和实验研究的重点和难点。肝纤维化动物模型的建立,既可以深入全面地研究肝纤维化发病机制,又可以为临床筛选防治肝纤维化药物提供基础研究。肝纤维化是多种慢性肝病发展至肝硬化的共同病理学基础,虽然对肝纤维化的研究已从细胞水平进入分子水平,但肝纤维化动物模型的建立,仍是临床研究和实验研究的重点和难点。肝纤维化动物模型的建立,既可以深入全面地研究肝纤维化发病机制,又可以为临床筛选防治肝纤维化药物提供基础研究。
【实验方法】
一、化学试剂诱导法
致病机理:
四氯化碳在肝细胞内经CYP2E1代谢产生的自由基可以损伤细胞膜,从而破坏肝细胞的结构和功能,造成肝细胞坏死。同时,肝脏内的星型细胞会活化,释放Ⅳ型胶原酶,降解ⅳ型胶原,合成分泌ⅰ型胶原,而引起胶原沉积和肝纤维化。
动物准备:
雄性的BALB / c小鼠10周龄(BALB / C比C57敏感,造模成功率更高)或SD大鼠(雄性200克左右)等,橄榄油,四氯化碳,注射器,电子天平。
实验步骤:
1、配制四氯化碳溶液,四氯化碳与橄榄油按照体积比1:4混匀,备用;
2、按小鼠体重0.5μl/ g CCl4(2.5μlCCl4橄榄油溶液)腹腔注射,每周2次,持续6周。空白对照组仅注射橄榄油2.5μl/ g;
3、在连续给CCl4 2周后,可随机抽取对照组和造模组小鼠各3只,检测ALT,AST,TBL以及切片等是否造模成功;
如图4所示,若模型成功,即可进行药物评价,继续处理4周后,即可处死小鼠,检测肝纤维化相关的标记,评价药物效果。
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