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考马斯亮蓝有G250和R250两种。其中考马斯亮蓝G250由于与蛋白质的结合反应十分迅速，常用来作为蛋白质含量的测定。考马斯亮蓝R250与蛋白质反应虽然比较缓慢，但是可以被洗脱下去，所以可以用来对病理组织内的蛋白质进行染色。通过PARISTM Kit Protein and RNA Isolationg System 核质分离试剂盒将细胞的胞核与胞质分开，提取这两部分的RNA，进行QP检测。检测胞质与胞核中目的基因及内参基因的表达在细胞总表达的占比。
实验方法
Step1: 细胞收集之后，预冷的PBS清洗一遍，3000g离心5min后取上清，置于冰上。加入合适体积预冷的Cell Fractionation Bufeer 重悬细胞，轻轻打匀。冰上孵育10min。
Step2: 孵育10分钟后，500g，4℃离心5min，分离胞浆和胞核。上清转移至新的无RNA酶的EP管中，置于冰上，此为胞浆。
Step3: 胞核沉淀加入预冷的Cell Fractionation Bufeer 重悬，吹打混匀后500g，4℃离心1min，去上清。胞核沉淀中加入预冷的Cell Disruption Buffer ,冰上裂解至溶液均一。(裂解至溶液透明）
Step4: 胞浆和胞核中分别加入等体积的2X Lysis/Binding Solution，上下颠倒混匀，室温裂解。
Step5: 加入与裂解液相同体积的无水乙醇，混合均匀。
Step6: 将混合液分别置于滤柱中过滤，10000g，室温离心1min,丢弃EP管，转移滤柱至试剂盒提供的EP管中进行清洗。
Step7: 加入700ulWash SolutionⅠ10000g，室温离心1min。倒掉液体，滤柱中加入500ulWash Solution2/3，10000g，室温离心,10000g,室温离心1min
Step8：倒掉废液，空管离心一次，10000g，室温离心1min,更换EP管。
Step9：DEPC水加热到95-100℃加35ul至滤柱中央，10000g室温离心30s。丢弃滤柱，分别得到胞浆和胞核的RNA。
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